大连中国学者science发论文揭示治愈乙肝新希望

在个体发育过程中，多种发育信号精确调控，分化产生功能各异的细胞并长期稳定地维持其生理功能。然而，这些功能细胞一旦离开体内微环境便会迅速去分化并失去功能。此外，由于缺乏适当的培养条件与微环境，体外源于干细胞诱导分化所获得的功能细胞，很难真正成熟并长期维持其功能。如何诱导获得功能成熟的细胞并在体外保持其功能性是再生医学的关键瓶颈。过去几十年里，人们尝试了改变培养材料、共培养及三维培养等多种方法，但始终未能建立一个简单高效且稳定的功能细胞体外培养体系。

为解决这一问题，北京大学生命科学学院教授邓宏魁课题组、解放军总医院教授卢实春课题组和复旦大学教授袁正宏课题组合作推进研究。其中，邓宏魁课题组以体外培养过程中快速失去功能的人原代肝细胞为研究对象，筛选到五种化学小分子组合（5 compounds，简称5C）并利用它们在体外成功实现了肝细胞功能的长期维持。在超过一个月的培养过程中，5C组合抑制了肝细胞的去分化，细胞整体基因表达谱与体内肝细胞高度相似，并长期维持了白蛋白分泌、尿素合成、药物代谢等肝细胞功能。

人原代肝细胞在五个化学小分子的协同作用下，能够在体外长期维持功能。这些长期维持功能的人肝细胞在药物研发方面具有广泛的应用价值；另一方面，它们可以支持乙肝病毒（HBV）完整的病毒复制周期，包括持续的产生共价闭合环状DNA（cccDNA），这为抗乙肝病毒药物提供了理想的高通量筛选模型。

肝细胞在体外药物代谢及药物研发方面具有重要的实用价值，然而长期以来功能维持条件的缺失极大限制了肝细胞的应用。在邓宏魁课题组新建立的5C培养体系中，体外培养的肝细胞能合成与体内水平相似的药物代谢酶，并具有长期维持药物代谢的能力，极大拓展了其在药物代谢、药物相互作用和药物毒性等方面的应用。

与此同时，研究团队基于5C培养条件，成功建立了乙型肝炎病毒感染模型：持续高水平表达乙肝表面抗原、e抗原、合成乙肝病毒DNA等感染指标，尤其是能够长期稳定产生乙肝病毒复制必需的cccDNA。这一模型的建立，对于乙肝病毒的深入研究与药物研发具有重要意义。我国约有1.2亿人携带乙肝病毒，目前仍无有效的治愈方法。因为乙肝病毒侵入肝细胞后，形成了一种很难被清除的病毒复制模板cccDNA，目前还没有针对这个病毒复制关键靶点的药物。相形之下，丙型肝炎病毒的发现虽然晚于乙肝病毒，但基于有效的体外病毒感染模型已成功筛选并获得治愈丙肝的药物。5C培养条件下的肝细胞支持乙肝病毒的高效感染，并能够长期产生cccDNA，可作为理想的药物筛选模型，为治愈乙型肝炎带来希望。

这项工作表明，化学小分子在精细调控细胞命运和功能上的优越性，这一方法也为其它类型细胞体外功能的长期维持提供了新途径。

中国工程院院士、复旦大学上海医学院教授闻玉梅认为，这是我国学者研究乙肝、丙肝以及其它肝脏疾病机理的一项重大突破。她认为，用此建立的较长期的人肝细胞体外培养平台，不仅将为研究乙肝治愈推进一大步，还提供了创新性研发抗肝炎病毒药物的重要工具。

来源：中华医学信息导报